如何鑒定空腸彎曲菌
如何鑒定空腸彎曲菌
空腸彎曲菌，你知道多少？
空腸彎曲菌是一種人畜共患病病原菌，可以引起人和動(dòng)物發(fā)生多種疾病，并且是一種食物源性病原菌，被認(rèn)為是引起全世界人類細(xì)菌性腹瀉的主要原因。
空腸彎曲菌的鑒定不好做？
怎么辦？怎么辦？怎么辦？
有老師反映空腸彎曲菌的鑒定不好做，小編就此咨詢了一些專家老師，得到的信息是，主要由兩個(gè)方面引起無(wú)法鑒定或者鑒定失敗：
（1）采樣時(shí)，由于空腸彎曲菌很嬌弱，采樣不當(dāng)容易造成菌體死亡，從而無(wú)法進(jìn)行鑒定。
（2）分離培養(yǎng)時(shí)，空腸彎曲菌生長(zhǎng)要求比較嚴(yán)格，生長(zhǎng)時(shí)間長(zhǎng)且鑒定實(shí)驗(yàn)步驟較多，無(wú)法得到較好的鑒定結(jié)果。
現(xiàn)場(chǎng)采樣：將樣品采樣樣品放入有肉湯的樣品袋中，使勁搖晃，使培養(yǎng)液充分洗刷樣品，然后將培養(yǎng)液帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行培養(yǎng)，后續(xù)按照國(guó)標(biāo)GB4789.9-2014進(jìn)行培養(yǎng)及鑒定。
普通采樣：按照采樣規(guī)則采樣后按照國(guó)標(biāo)GB4789.9-2014進(jìn)行培養(yǎng)及鑒定。
取 25 g（mL) 樣品（水果、 蔬菜、水產(chǎn)品為 50 g）加入盛有 225 mL Bolton 肉湯的有濾網(wǎng)的均質(zhì)袋中（若為無(wú)濾網(wǎng)均質(zhì)袋可使用無(wú)菌紗布過(guò)濾）。
使用重量稀釋儀，設(shè)置好稀釋倍數(shù)，儀器自動(dòng)稱量樣品重量，根據(jù)設(shè)置好的稀釋倍數(shù)，快速準(zhǔn)確地加入培養(yǎng)液，無(wú)須擔(dān)心采樣時(shí)無(wú)法精確稱量25g，也無(wú)需人工換算所需培養(yǎng)液，免除人工加樣可能造成的漏液和污染。
用拍擊式均質(zhì)器均質(zhì) 1 min～2 min，將濾過(guò)液進(jìn)行培養(yǎng)。
在微需氧條件下， 36 ℃±1 ℃培養(yǎng) 4 h，如條件允許配以 100 r/min 的速度進(jìn)行振蕩。必要時(shí)測(cè)定增菌液的 pH 值并調(diào)整至 7.4 ±0.2， 42 ℃±1 ℃繼續(xù)培養(yǎng) 24 h～48 h。
將 24 h 增菌液、48 h 增菌液及對(duì)應(yīng)的 1:50 稀釋液分別劃線接種于 Skirrow 血瓊脂與 mCCDA 瓊脂平板上，微需氧條件下 42 ℃±1 ℃培養(yǎng) 24 h～48 h。另外可選擇使用空腸彎曲菌顯色平板作為補(bǔ)充。
使用接種儀將稀釋好的增菌液接種于Skirrow 血瓊脂與 mCCDA 瓊脂平板，可以快速均勻地將菌液接種到平板，易于得到單個(gè)純化菌落，提高接種后培養(yǎng)基菌落分辨率。
需進(jìn)行氧化酶試驗(yàn)、過(guò)氧化氫酶試驗(yàn)、馬尿酸鈉水解試驗(yàn)除、吲哚乙酸酯水解試驗(yàn)等；對(duì)于確定為彎曲菌屬的菌落，可使用生化鑒定試劑盒或生化鑒定卡代替上述試驗(yàn)進(jìn)行鑒定。
（1）使用API的CAMPY彎曲桿菌鑒定板條，選取分離得到的可疑菌落配置成0.5MCF菌懸液，按照說(shuō)明書(shū)加入板條中，孵育培養(yǎng)后將數(shù)據(jù)輸入(https://apiweb.biomerieux.com/servlet/Authenticate?action=prepareLogin)得到鑒定結(jié)果。
（2）使用VIDAS的CAM試條，選取分離得到的可疑菌落配置成0.5MCF菌懸液，按照說(shuō)明書(shū)的步驟加入板條中，上機(jī)進(jìn)行檢測(cè)，最終得到鑒定結(jié)果。
（3）使用VITEK 2 Compact的NH奈瑟球菌-嗜血桿菌鑒定卡時(shí)，選取分離得到的可疑菌落配置成0.5MCF菌懸液，按照說(shuō)明書(shū)的步驟加試管中，上機(jī)進(jìn)行檢測(cè)，最終得到鑒定結(jié)果。
空腸彎曲菌檢驗(yàn)程序
